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SYBR Green核酸染料(10000× in DMSO,電泳級)

SYBR Green核酸染料(10000× in DMSO,電泳級)

產(chǎn)品編號:SY001

產(chǎn)品規(guī)格:50μl

數(shù)量
價格 ¥200

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SYBR Green核酸染料(10000× in DMSO,電泳級)

●  產(chǎn)品規(guī)格:

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

包裝

SY001

SYBR Green核酸染料 10000× in DMSO,電泳級)

50 μl

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說明書

一份

簡介:

SYBR Green是高靈敏的DNA熒光染料,適用于各種電泳分析,操作簡單,至少可檢出20 pg DNA,高于EB染色法25-100倍。SYBR Green dsDNA 結(jié)合熒光信號會增強800-1000倍,用SYBR Green染色的凝膠樣品熒光信號強,背景信號低,可適用于多種電泳分析。

SYBR Green適合于多種凝膠電泳方法:瓊脂糖凝膠,聚丙烯酰胺凝膠電泳,脈沖電場凝膠電泳以及毛細管電泳等。SYBR Green與雙鏈DNA的親和力非常高,因此可以用做電泳前染色,對分子生物學(xué)中常用的酶(如:Taq 酶、逆轉(zhuǎn)錄酶、內(nèi)切酶、T4連接酶等)沒有抑制作用。另外,SYBR GreenEB相比,誘變能力大大降低。

貯存:4℃,避光保存。

●  SYBR Green使用方法:

注意:染料使用前應(yīng)在室溫下徹底融化混勻后使用。

SYBR Green后染方法(推薦方法)

1. 制作不含染料的凝膠,按照常規(guī)方法進行電泳。

2. pH 7.0 - 8.5 的緩沖液(如:TAE,TBE TE),按照100001的比例稀釋SYBR Green濃縮液(如50ml 1×TAE中加入5μl 染料),混勻,制成染色溶液。

3. 將染色溶液倒入合適的聚丙烯容器中,放入凝膠,用鋁箔蓋住容器使染料避光。室溫振蕩染色10-30分鐘,染色時間因凝膠濃度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝膠直接在玻璃平皿上染色,將配好的工作溶液輕輕地倒在膠板上,讓工作液均勻地覆蓋整個膠板,并染色30分鐘。玻璃平皿必須預(yù)先經(jīng)過硅烷化溶液處理(避免染料吸附在玻璃表面上)。

4. 紫外燈下觀測。

SYBR Green預(yù)染方法

1. 制膠:按常規(guī)方法制備凝膠,凝膠溫度降至60℃左右時加入10000×SYBR,使染料終濃度為1×,如40ml凝膠溶液中加入4μl染料。

2. 上樣、電泳后紫外燈下觀察。

SYBR Green使用注意事項

1.后染方法是推薦方法,能得到更好的電泳結(jié)果;由于SYBR對樣品過量非常敏感,預(yù)染方法容易出現(xiàn)條帶扭曲變形(建議泳道中每條帶的含量不要超過5ng),請根據(jù)實際情況摸索出適合自己的實驗程序,

2. SRBR對電泳緩沖液的pH要求嚴格,有效pH7.5-8.0,電泳時盡量使用新鮮配制的緩沖液,并保證合適的pH范圍。

3. SYBR Green 對玻璃和非聚丙烯材料具有一定親合力。建議在稀釋、貯存、染色等使用過程中用聚丙烯類容器。

4. 使用酒精沉淀核酸中,SYBR Green可以全部從雙鏈核酸上去掉。

5. 如果想對用 SYBR Green染過的膠進行 Southern blot,建議在預(yù)雜交和雜交溶液中加入 0.1%- 0.3% SDS,可以有效去除SYBR。


 
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