快速蛋白鋅染試劑盒
|
產(chǎn)品編號
|
規(guī)格
|
運輸
|
|
RTD6206
|
10 T
|
RT
|
● 產(chǎn)品組成：
|
產(chǎn)品編號
|
產(chǎn)品名稱
|
規(guī)格
|
貯存
|
運輸
|
|
RTD6206-01
|
增強液（100×）
|
5
ml
|
RT
|
RT
|
|
RTD6206-02
|
染色液（10×）
|
60
ml
|
4-8℃
|
RT
|
|
RTD6206-03
|
顯色液（10×）
|
60
ml
|
4-8℃
|
RT
|
|
RTD6206-04
|
脫色液（10×）
|
100
ml
|
4-8℃
|
RT
|
|
-
|
說明書
|
1份
|
-
|
-
|
● 產(chǎn)品簡介：
本試劑采用以鋅離子為基礎的負染色方法，用于SDS-PAGE或Native-PAGE電泳凝膠染色，不需要使用含有刺激性的甲醛和冰醋酸，實驗方便快速，可以在30 min左右完成，最低能夠檢測出2 ng的蛋白條帶，該方法不對蛋白質(zhì)產(chǎn)生修飾作用，而且經(jīng)過脫色液處理后，可以用于電洗脫或采用PAGE膠蛋白微量回收試劑盒（貨號：RTD8108）進行膠回收，以便進行質(zhì)譜和測序分析等，也可以用于其他染色方法（銀染或考染）對膠重新染色。
按照每次使用50 ml1×即用型染色液計算，本產(chǎn)品可以染色 8-10塊mini-PAGE（8×10cm）膠。
● 儲存條件
按照標簽溫度貯存，常溫運輸。開封后一年有效。
● 凝膠染色的操作步驟：
以下步驟以一塊1 mm厚度8×10cm的凝膠操作為例。
一. 漂洗：
取出電泳后的 PAGE 凝膠，用超純水漂洗兩次，每次1分鐘。
二. 染色：
2.1 準備1×即用型染色液：
|
組份
|
50 ml 1×即用型染色液
|
|
染色液（10×）
|
5
ml
|
|
增強液（100×）
|
0.5
ml
|
|
超純水
|
定容至50 ml
|
2.1凝膠染色：
凝膠中加入50 ml 1×即用型染色液，常溫搖床慢搖10分鐘。
注：增強液(100×)在低溫條件下會產(chǎn)生白色沉淀，請在使用前60℃水浴中加熱，震蕩至完全溶解后使用。
三. 漂洗：
棄染色液，用超純水漂洗凝膠兩次，每次1分鐘，至泡沫完全清除干凈。
四. 顯色：
4.1 準備工作：將顯色液（10×）用超純水稀釋10倍，配成1×即用型顯色液。
4.2凝膠中加入 50 ml 1×即用型顯色液中，搖床慢搖30-60秒。觀察結果：在黑色背景下，可見光觀察，蛋白條帶為棕褐色，無蛋白區(qū)域為類白色；可見光燈箱觀察（凝膠底部打光），蛋白質(zhì)條帶反顯白色，無蛋白的膠區(qū)則為白色。
五. 漂洗：
棄顯影液，超純水洗滌凝膠2次，每次搖床慢搖1分鐘。
注：凝膠可以在水中保存1-2周。
六. 脫色：
6.1 準備工作：將脫色液（10×）用超純水稀釋10倍，配成1×即用型脫色液。
6.2 如需要進行蛋白切膠回收，將所需的蛋白質(zhì)條帶切下，用超純水漂洗切下的凝膠一次；如凝膠需要考染或銀染，直接用超純水漂洗整個凝膠一次。
6.3 棄水，凝膠中加入適量1×即用型脫色液覆蓋凝膠，搖床慢搖5分鐘，倒掉脫色液；
6.4 重復脫色步驟2次。脫色完全的標志是白色凝膠完全脫色為無色透明。
6.5 超純水漂洗凝膠兩次，進行后續(xù)實驗操作。
● 實驗示例：
4-20% RealPAGE Precast Gel
lane 1-4: BSA 10μg
M：RTD6149 10-250kD
lane 5: Bacterial Lysis
凝膠顯影后(脫色前)蛋白條帶在黑色背景下為棕褐色
可見光燈箱觀察（凝膠底部打光），蛋白質(zhì)條帶反顯白色